四溴双酚A（tetrabromobisphenol A，TBBPA）作为最为广泛使用的一类溴代阻燃剂（brominated flame retardants，BFRs）在工业发展中占据较大份额，被广泛应用于塑料、电子、建筑、纺织等材料与产品中。TBBPA是一种内分泌干扰物，能够引起甲状腺激素干扰作用、肝毒性、肾毒性、神经毒性和生殖毒性^［1］。同时，它在被焚化处理时，会释放出溴化的二恶英和呋喃，这两种物质都是极易致癌物质^［2］。环青春期雌性大鼠的青春期发育和甲状腺功能试验对甲状腺干扰物质比较敏感。目前鲜见TBBPA对环青春期雌性大鼠的毒性研究。本研究参照美国环境保护局化学物安全和污染防治指南US EPA OCSPP 890.1450（环青春期雌性大鼠的青春期发育和甲状腺功能试验）^［3］，通过观察大鼠阴道开口时间和动情周期，对大鼠的主要器官、激素水平、血常规、血生化以及病理等观察指标进行研究，初步探讨TBBPA对环青春期雌性大鼠的毒性作用。 
        四溴双酚A，白色粉末，微溶于水，购自北京精华耀邦医药科技有限公司，纯度≥99.90%，批号：20150723。
        直接购买明确天数的SD雌性仔鼠60只，19日龄，体质量（41.1±5.15） g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供［SPF级，动物合格证号：SCXK（京）2015-0007］。颗粒饲料由北京华阜康生物科技股份有限公司提供［许可证号：SCXK（京）2015-0008］。饲养地点为首都医科大学附属北京口腔医院动物房［SPF级，合格证号：SCXK（京）2014-0032］，室温（22±2） ℃，湿度45%~55%，12 h明暗交替，自由进食和饮水。
        MEK-6813K全自动血球计数仪（日本光电）、AU680全自动生化分析仪（贝克曼库尔特株式会社）、电子分析天平、生物显微镜、低速离心机。
        血生化检测试剂盒（北京美康百泰医药科技有限公司），酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒（北京博乐通生物科技有限公司）。
        适应性喂养2 d后，按体质量随机分为4组：对照组和TBBPA低、中、高剂量组，受试物掺入饲料给予，浓度分别为0、2、6、18 mg/kg BW，每组15只，从出生后天数（PND）22至PND42。
        喂养期间每周称重，观察并记录阴道开口时间和体质量，从阴道开口之日起，每天进行阴道涂片观察动情周期，试验结束后，麻醉腹主动脉采血处死动物，取卵巢、子宫、大脑、肝、肾、肾上腺、脾、垂体、甲状腺（解剖时同时取气管，固定在10%的中性福尔马林缓冲液24 h，分离甲状腺后单独测定其质量），并计算脏器系数，利用对照组和高剂量组动物脏器进行组织病理学检查，高剂量组有病理学变化再开展中、低剂量组的病理学检查。
        利用全自动血球计数仪测定白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、血小板计数、白细胞分类比例、白细胞分类计数等指标；血液离心取血清，利用全自动生化分析仪测定血清碱性磷酸酶、白蛋白、碱性磷酸酶、丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、胆固醇、甘油三酯、总蛋白、肌酐和尿素氮等指标；用酶联免疫吸附法测定血清总甲状腺素（T4）和血清促甲状腺激素（TSH）。
        试验结果以均数±标准差（±s）表示，计量资料采用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析。方差齐时组间均数比较采用LSD法，方差不齐时组间均数比较采用Tambane’s T2法，设定检验水准α=0.05，P＜0.05为差异有统计学意义。 
        试验期间，动物饮食、活动均正常，生长状况良好，无明显毒作用表现，动物无死亡例数。连续给予受试物21 d后，大鼠各剂量组体质量均随时间延长而增长，组间差异无统计学意义（P＞0.05），结果见图1。
        由表1可见，与对照组比较，各剂量组阴道开口时间和阴道开口时体质量差异均无统计学意义（P＞0.05）。
        由表2可见，与对照组比较，各剂量组大鼠第一次动情期和动情周期差异均无统计学意义（P＞0.05）。
        由表3可见，与对照组比较，各剂量组肝脏的脏体系数明显下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；与对照组比较，高剂量组甲状腺的脏体系数和低、高剂量组甲状腺的脏脑系数明显下降，差异有统计学意义（P＜0.05）。
        由表4可知，与对照组比较，各剂量组T4和TSH差异无统计学意义（P＞0.05）。
        由表5可见，与对照组比较，中剂量组血小板计数和血小板压积明显降低，差异有统计学意义
 （P＜0.05），但无剂量-反应关系，且这些指标均在本实验室历史参考值范围内，故无生物学意义。
        由表6可见，与对照组比较，中、高剂量组大鼠胆固醇和血糖含量，以及各剂量组高密度脂蛋白含量均有所降低，差异均有统计学意义（P＜0.05）。
        对照组和高剂量组大鼠卵巢、子宫、肾脏、肝脏和甲状腺的组织病理学检查结果见图2。卵巢的卵母细胞呈圆形、椭圆形或多角形，结构易于识别，未见卵泡的发育异常及组织内出血、炎症等病理变化（A、B）。子宫大小形态正常，宫壁回声均匀，内膜线清晰（C、D）。对照组和高剂量组肾脏结构可清晰识别，肾单位呈均匀分布，肾小球和肾小管结构正常，未见间质细胞增生及肾小球萎缩等病变（E、F）。肝脏细胞呈圆形或长圆形，细胞界限清晰，细胞质均匀，细胞核基本呈圆形，未见细胞形态改变和空泡化（G、H）。甲状腺滤泡大多呈圆形或椭圆形，滤泡周围均匀分散着细胞，细胞呈扁平状，滤泡腔内充满均匀的胶质，极少观察到胶质中有圆形或椭圆形的空泡，且滤泡细胞高度和胶体面积变化不大（I、J）。经对比发现，对照组与高剂量组卵巢、子宫、肾脏、肝脏和甲状腺均未见异常现象。病理图片放大倍数均为20×10。 
        TBBPA具有潜在的持久性、生物累积性和毒性，是一种类似于持久性有机污染物（persistent organic pollutants，POPs）的环境内分泌干扰物，对环境和生物体产生严重影响。研究表明TBBPA非常容易积累在人体内，长期接触会抑制甲状腺的发育，对内分泌系统有毒性^［4-5］。Chan等^［6］研究发现TBBPA暴露能降低血清中三碘甲状腺原氨酸（T3）或T4和TSH水平。Terasaki等^［7］发现TBBPA与甲状腺激素运载蛋白有很强的结合能力，能够干扰
        孕期小鼠摄入含1%TBBPA的食物可以导致母体和幼体肝肾的损伤^［9］。陈玛丽^［10］发现TBBPA暴露（0.01、0.1 mg/L）能够引起红鲫肝脏脂肪化、空泡化和线粒体囊泡化，剂量增大则能够导致肝脏细胞核损伤和细胞间隙增大。大鼠暴露于TBBPA（15.7、140.5、1 639.7 mg/kg BW）中均能够增加肝细胞局灶性坏死和肝内炎性细胞浸润^［11］。本研究亦表明TBBPA对肝脏和血糖有影响。
        综上所述，TBBPA对环青春期雌性大鼠肝脏、甲状腺和血糖有影响。在后续研究中应增加暴露水平和/或延长暴露时间，进一步探索其影响机制。