不同水源中GⅡ型诺如病毒实时荧光逆转录聚合酶链式反应检测方法建立及应用
作者:
作者单位:

(国家食品安全风险评估中心 国家卫生健康委员会食品安全风险评估重点实验室,北京 100021)

作者简介:

李楠 女 副研究员 研究方向为食品卫生 E-mail:linan100041@cfsa.net.cn通信作者:┣┣(中)通信作者┫┫江涛 男 研究员 研究方向为食品卫生 E-mail:jiangtao001@cfsa.net.cn

通讯作者:

中图分类号:

基金项目:


Development and application of real-time reverse transcription polymerase chain reaction for detection of Norovirus GⅡ in water
Author:
Affiliation:

(NHC Key Laboratory of Food Safety Risk Assessment, China National Center for Food Safety Risk Assessment,Beijing 100021,China)

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    摘要:

    目的 建立不同水源中GⅡ型诺如病毒(NoV GⅡ)实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法,对某市疾病预防控制中心送检的10份疑似引起诺如病毒中毒的水样进行NoV GⅡ检测。方法 以瓶装水、河水和生活污水为研究对象,采用硝酸纤维素膜-聚乙二醇(PEG)沉淀法富集病毒,对取样体积、病毒洗脱条件、PEG终浓度及PEG沉淀条件等进行了优化,提取病毒RNA、建立实时荧光RT-PCR检测方法;通过外加MS2计算方法的回收率,评价所建方法对水样中诺如病毒的回收效果。结果 建立的方法对瓶装水、河水和生活污水中NoV GⅡ的平均回收率分别为(60.1±8.0)%、(22.0±6.5)%和(35.7±8.1)%,10份送检水样中3份检出NoV GⅡ。结论 建立的实时荧光RT-PCR方法适用于瓶装水、河水和生活污水中NoV GⅡ的检测,饮用水被NoV GⅡ是引发某市人员中毒的原因之一。

    Abstract:

    Objective To develop a real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) method for detection of Norovirus GⅡ (NoV GⅡ) in water. To survey NoV GⅡ in 10 water samples. MethodsNitrocellulose membrane and PEG precipitation were used to enrich virus in bottle water, river and sewage samples, and real-time RT-PCR method was developed. The recoveries from MS2 spiked samples were used to evaluate the effect of the established method. Results The average recoveries of bottle water, river and sewage samples were (60.1±8.0)%, (22.0±6.5)% and (35.7±8.1)% respectively. Three in 10 submitted water samples were positive for NoV GⅡ. Conclusion A real-time PCR method for detection of NoV GⅡ in water sources was developed in this study. NoV G Ⅱ was one of the reasons of the poisoning incidents.

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    引证文献
引用本文

李楠,王佳慧,李凤琴,江涛.不同水源中GⅡ型诺如病毒实时荧光逆转录聚合酶链式反应检测方法建立及应用[J].中国食品卫生杂志,2018,30(6):597-602.

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  • 收稿日期:2018-11-14
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  • 在线发布日期: 2019-01-23
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