2019-2021年浙江省湖州市食源性沙门氏菌感染病例特征分析

徐德顺，严伟，卢忠豪

湖州市疾病预防控制中心 浙江 313000

摘要: 目的 了解湖州市食源性沙门菌感染病例特征，为食源性疾病防控提供依据。方法 收集2019年-2021年湖州市6家食源性疾病监测哨点医院的沙门氏菌感染病例就诊信息，采集样本进行沙门氏菌检测、血清学分型和菌株同源性分析。结果 共收集病例样本6569份，检出沙门氏菌阳性样本105份，阳性率为1.16%。沙门氏菌阳性病例中男性阳性检出率高于女性，但二者阳性检出率比较无统计学意义；20～岁年龄组检出率最高(5.16%)，其次为40～岁年龄组(2.10%),不同年龄组之间的阳性率差异有统计学意义(χ2=15.189，P＜0.05 )；家庭是沙门氏菌感染的主要场所，引起感染可疑食物主要为肉与肉制品(17.14%)，其次是粮食类及其制品(15.24%)；菌株的血清型别以鼠伤寒沙门菌检出率最高(35.24%)，其次是肠炎沙门氏菌(18.10%)；同源性图谱分析显示鼠伤寒沙门菌相似度为29.1%-100.0%，肠炎沙门菌相似度为30.3%-100.0%。结论 2019年-2021年湖州市检出的沙门氏菌除一起为聚集性疫情外均为散发病例，加强对食源性疾病中沙门氏菌的持续监测有助于开展沙门氏菌引起的食源性疾病的风险评估，为防控沙门氏菌提供参考依据。

关键词: 沙门氏菌；食源性疾病；血清分型；同源性分析

Analysis on the characteristics of foodborne salmonella infection cases in Huzhou city, Zhejiang Province, 2019-2021

             XU Deshun，YAN Wei， LU Zhonghao

Huzhou Center for Disease Control and Prevention, Huzhou, Zhejiang 313000, China

Abstract: Objective To investigate the case characteristics of foodborne salmonella infection in Huzhou city so as to provide a scientific basis for its prevention and control．Methods From 2019 to 2021，the case information of foodborne disease were collected from 6 foodborne disease surveillance sentinel hospitals，and samples were collected for Salmonella detection，serological typing and homology analysis. Results A total of 6569 samples of surveillance cases were collected，105 Salmonella positive samples were detected，and the positive detection rate was 1.16% . Among positive cases，male proportion were relatively high，but there was no statistical significance in the positive detection rate between them.The proportion of 20～ age group was relatively high(5.16%)，The second group was 40 ~ age group (2.10%), and the positive rate difference among different age groups was statistically significant (χ2=15.189，P＜0.05 ). Household was the main place of salmonella infection, and meat and meat products were the main suspect food (17.14%), followed by grain and its products (15.24%). Among different serotypes of positive cases，Salmonella typhimurium and Salmonella enteritidis accounted for a higher proportion，accounted for 35.24% and 18.10%. Homology analysis showed that the homology of Salmonella typhimurium strains were within 29.1%-100.0%，Salmonella enteritidis strains were within 30.3%-100.0%. Conclusion From 2019 to 2021，the positive cases detected in Huzhou were sporadic cases except for one cluster outbreak，and the aggregation was not found. Strengthening the continuous surveillance of Salmonella in foodborne diseases can help to carry out the risk assessment of foodborne diseases caused by salmonella and provide reference for the prevention and control of salmonella.

Key Words: Salmonella; Foodborne disease; Serotyping; Homology analysis

食源性疾病( foodborne disease) 是当今世界上分布最广泛、最常见的疾病之一，是当今世界范围内最为突出的公共卫生问题之一[1]。在中国每年大约有2.09 亿食源性疾病患者[2]。而沙门氏菌是世界各地普遍存在的、也是分布最广泛的食源性致病菌之一[3]。据报道[4]全球每年约有9 000 万人因感染沙门菌引起食物中毒，在我国沙门氏菌也是居食源性疾病致病菌的前3 位[5]，对人类身心的健康和世界经济发展产生较为严重的影响。为了解湖州市近几年食源性疾病沙门氏菌的感染情况和流行趋势，提高食源性疾病的预防与处置能力，本文对2019-2021年收集的食源性沙门氏菌感染病例的基本信息和实验室检测结果进行统计分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1资料 

资料来源于湖州市6家哨点医院2019-2021年食源性疾病监测数据，包括患者基本信息、症状体征及标本的实验室检测结果。监测病例定义参照国家食源性疾病监测工作手册 :主诉为怀疑由食物引起的以腹泻为主要症状，且每日大便次数≥3 次，粪便性状异常(稀便、水样便、黏液便或脓血便等)的患者。

1.2主要仪器与试剂 

脉冲场凝胶电泳仪(CHEF Mapper XA)、凝胶成像仪(GelDoc XR+)均购自美国Bio-Rad，全自动细菌鉴定仪(Vitek 2 Compact，法国梅里埃)，全自动微生物鉴定与药敏分析系统(AIM+Vizion，美国Thermo Fisher)。沙门氏菌诊断血清(日本生研株式会社)，限制性内切酶Xba I(日本TaKaRa)，Gelred染料(美国Biotium)，琼脂糖(SeaKem Gold，美国Lonza)，蛋白酶K(美国Merck)，革兰阴性药敏鉴定板(美国Thermo Fisher)，沙门氏菌显色平板(法国CHROM agar)。检测试剂均在有效期内使用。

1.3方法

1.3.1细菌分离鉴定和血清学试验

参照《浙江省食源性疾病监测工作手册》描述的试验方法和步骤进行试验，腹泻患者粪便(肛拭)样本通过沙门氏菌的选择性增菌培养(SBG )增菌培养，再接种于沙门氏菌显色培养皿进行分离培养以及分纯培养后进行菌株鉴定。阳性菌株再进行血清分型，根据沙门氏菌属抗原表判断血清型。

1.3.2同源性分析

参照 PulseNet China 沙门菌PFGE标准操作程序[6]，用BioNumerics 7.6 软件进行图谱分析，采用Dice系数衡量带型相似度。用非加权组平均法(UpGMA)进行聚类，按照Tenover原则判断菌株间关系。

1.3.3 统计学分析 

用Excel 2013和SPSS 22.0软件对收集的数据进行统计分析，检出率的变化采用卡方检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1沙门菌阳性率检出情况 

2019-2021年共采集到食源性疾病主动监测病例标本6569份，检测发现沙门氏菌阳性样本105份，阳性率为1.60%(105/6569)。2019年共采集病例标本2159份，检出沙门氏菌阳性标本49份，检出率为2.27%；2020年共采集标本2161份，检出沙门氏菌阳性标本25份，检出率为1.16%； 2021年共采集标本2249份，检出沙门氏菌阳性标本31份，检出率为1.38%。不同年份沙门氏菌阳性检出率差异有统计学意义( χ2=12.753，P＜0.05)。

2.2 感染病例人群分布 

采集的6569份标本中采自男性患者样本3594份，检出阳性标本59份，阳性检出率为1.64% ，采自女性患者标本2975份，检出阳性标本46份，阳性检出率1.55%；不同性别间沙门氏菌阳性检出差异无统计学意义(P＞0.05)；年龄最小为4岁，最大为78岁，20～岁年龄组检出率最高，为5.16% ( 51/988 )，其次为40～岁年龄组，阳性检出率为2.10% (25/1189),不同年龄组之间的沙门氏菌阳性检出率差异有统计学意义( χ2=15.189，P＜0.05),表1。

表1  2019－2021年湖州市不同人群沙门氏菌检出情况

Table 1 Salmonella detection in different populations in Huzhou from 2019 to 2021

2.3主要临床症状分布 

沙门氏菌感染病例中消化系统症状最多的是腹泻，占54.29%(57/105)，其次腹痛19.05%(20/105)，呕吐13.33%(14/105)，恶心10.48%(11/105)。腹泻次数最多的是5～10 次占50.48%(53/105),其次是3～5次，占34.29%(36/105)。大便性状以水样便为主，占73.33%(77/105)，其次是粘液便占9.53%(10/105)，稀便占6.67%(7/105)。

2.4沙门菌阳性病例可疑暴露食品分布情况 

引起沙门菌感染可疑食物以肉与肉制品为主，占比17.14%，其次是粮食类及其制品(15.24%)、水产动物及其制品(11.43%)和水果类及其制品(10.48%)，表2。家庭是引起沙门菌感染性腹泻可疑暴露食品的进食场主要场所，占65.71%，其次是饭店( 酒店)，占25.71%，表3。

表2 2019 年-2021年湖州市沙门氏菌阳性病例可疑暴露食品分布

Table 2 Distribution of food suspected to be exposed to salmonella positive cases in Huzhou from 2019 to 2021

表3 2019-2021 年湖州市沙门菌阳性病例可疑食物进食场所分布

Table 3 Distribution of suspected food eating places of salmonella positive cases in Huzhou from 2019 to 2021

2.5 血清型分布 

105株沙门氏菌通过血清学分型鉴定分为26种血清型，其中检出最多的是鼠伤寒沙门菌37株(35.24%)、其次是肠炎沙门菌19株(18.10%)，除了这两种血清型占据主导地位以外，还有多种血清型不同程度的检出，呈现散发状存在，具体见表4。

表4 2019-2021 年湖州市分离的食源性沙门氏菌株中血清型分布

Table 4 Serotype distribution of foodborne salmonella isolates in Huzhou from 2019 to 2021

2.6沙门菌同源性分析

对占主导地位的鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门氏菌菌株利用PFGE技术进行分子分型。37 株鼠伤寒沙门菌的PFGE聚类分析显示，带型相似度在29.1%-100.0%之间。根据条带的数量和位置的不同，共得到36个不同PFGE型别，仅有1种型别包含2个菌株。相似度达到85.00%以上的克隆系有6个，每个克隆系包含2-9株菌，无明显的同源表现( 图1) 。

在19 株肠炎沙门氏菌PFGE聚类分析显示，带型相似度在30.3%-100.0%之间。根据条带的数量和位置的不同，共得到14个不同PFGE型别，1种型别包含5株菌株,1种型别包含2株菌株。相似度达到85.00%以上的克隆系有2个，每个克隆系包含5-9株菌，其中型别相似度100%的有7株。( 图2)。

                    图1  37株鼠伤寒沙门菌同源性分析

Figure 1 Homology analysis of 37 strains of Salmonella typhimurium

                        图2  19株肠炎沙门菌同源性分析

Figure 2 Homology analysis of 19 Strains of Salmonella enteritis

3讨论

世界卫生组织(WHO)指出，沙门菌是一种在人和动物间广泛传播病原菌，主要是通过被污染的食物引起感染，也是引起感染性腹泻的重要病原菌之一[7]。本文资料分析显示2019-2021年湖州市食源性疾病主动监测病例中沙门氏菌的阳性率检出为1.06%，低于2016年浙江省[8]和2013-2018 年四川省[9]食源性疾病主动监测病例中沙门菌的阳性率(分别为2.21%和4.09%)，但高于2014-2019年辽宁省(0.56%)[10]，这可能与地域性或食品结果差异有关。人群分布情况分析发现，男性阳性检出率要略高于女性，但两者差异无统计学意义(P＝0.691)；沙门菌感染病例数最高的是20～岁年龄组，其次为40～岁年龄组，不同年龄组阳性率有差异(P ＜0.05 ),与相关文献[7,11]报道基本一致。

有研究表明食源性疾病发生常与家庭有关[12]，沙门菌感染主要的来源为动物性食品[13]，本研究结果显示，2019-2021年湖州市沙门氏菌感染主要来源为肉与肉制品，其次是粮食类、水产动物及其制品和水果类及其制品，且进食场所分布主要集中在家庭，与部分省市相似[7，14，15]，这可能家庭生活中肉与肉制品或水产动物及其制品中沙门菌污染砧板、刀具等厨房用具引起交叉污染有一定的关系。

研究显示沙门菌的感染水平和血清型均存在一定的地域性差异[11]。上海[16]血清型以肠炎沙门菌为主(45．24%) ，鼠伤寒沙门菌仅占13．81%，福建[14]、江苏[15]、湖南[11]以鼠伤寒沙门菌为主，分别占57.85%、41.9%和68. 17%。本次研究发现湖州市2019年-2021年食源性疾病主动病例中检出的沙门氏菌中以鼠伤寒沙门菌所占比例最高(35.24%)，其次是肠炎沙门氏菌(18.10%)，还有多种血清型呈散发状态，这与嘉兴地区、河南省及辽宁省等地方沙门氏菌的流行情况基本一致[7,10，11]。

通过对不同来源菌株进行同源性分析，可以掌握不同病例之间的关联性，判断感染是散发的还是聚集性的，也可以对感染进行病原菌溯源，特别是对聚集性疫情的分析、处置具有很好的实际意义。本文通过PFGE分子分型技术对检出率较高的鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌的菌株分别进行同源性分析。有研究结果[15]显示，沙门菌的流行存在一定的优势菌株，且同一血清型中有些菌株之间有较高的同源性。本文资料分析发现本地区的沙门氏菌以鼠伤寒沙门菌为优势流行血清型，通过对占主导优势的鼠伤寒沙门菌PFGE聚类分析共得到36个不同PFGE型别，带型相似度在29.1%-100.0%之间，仅有1种型别包含2个菌株，无明显的同源表现。19 株肠炎沙门氏菌PFGE聚类分析共得到14个不同PFGE型别，带型相似度在30.3%-100.0%之间，型别相似度100%的有7株，其中1种型别包含5株菌株，经资料分析显示为一起聚集性疫情病例分离的菌株，另外1种型别包含2株菌株，但分离于不同的区域或时间，为非聚集性病例分离株。加强食源性疾病病例中沙门氏菌的持续监测和同源性分析，为及时发现和处置由沙门氏菌感染引起食源性疾病聚集性疫情的防控提供科学依据。

参考文献

[1] 孙长颢.营养与食品卫生学[M].第8 版.北京:人民卫生出版社,2017:426．

[2]Chen Y, Yan WX, Zhou YJ, et al. Burden of self-reported acute gastrointestinal illness in China: a population-based survey[J].BMC Public Health, 2013,13:456.

[3]Majowicz SE, Musto J, Scallan E, et al. The global burden of nontyphoidal Salmonella gastroenteritis[J]. Clin Infect Dis, 2010, 50(6):882–889.

[4]林一曼,石晓路,李迎慧,等.2012-2013 年深圳市非伤寒沙门菌血清型分布、耐药性及PFGE分型研究[J].热带医学杂志,2018,18(1):79-81,96．

[5]陈艳,郭云昌,王竹天,等.2006 年中国食源性疾病暴发的监测资料分析[J].卫生研究,2010,39(3):331-334.

[6]王炳发,曹春远,陈前进,等.两起肠炎沙门菌所致食物中毒的病原学研究及溯源分析[J].中国食品卫生杂志,2016,28(1): 32-36.

[7]时粉娟,陆锦琪,王蔚,等.2017 年-2019 年嘉兴市某综合医院食源性沙门菌阳性病例特征分析[J].中国卫生检验杂志,2021,31(17):2115-2118.

[8] 陈江,齐小娟,张政,等.2016 年浙江省食源性疾病监测结果分析[J].中国预防医学杂志,2019,20(1):6-10．

[9]陈文，兰真，杨小蓉，等.2013-2018年四川省食源性疾病哨点医院主动监测结果分析[J].现代预防医学,2020,47(13):2466-2470.

[10]刁文丽，王凯琳，宋蕴奇，等.2014-2019 年辽宁省食源性疾病流行病学分析[J].中国食品卫生杂志,2021,33 (4):451-455.

[11]吴诗蓝,段宏波,贾华云,等.2015-2019年湖南省食源性沙门菌流行病学特征分析[J].实用预防医学,2021,28(12):1428-1432.

[12]张黎,朱江辉,徐海滨,等. 2015年中国居民家庭厨房内生肉加工行为现况调查[J].实用预防医学,2017,24(3):275-279，290.

[13]李欣,俞佳莉,乔雪飞,等.沙门氏菌在食品与食源性疾病中分布及病原特征分析[J].实用预防医学,2020,27(7):801-806.

[14]刘雪杰,陈伟伟,傅祎欣,等. 2015-2018年福建省食源性疾病沙门氏菌监测情况分析[J].中国人兽共患病学报,2020，36(3):223-228.

[15]沈赟,秦思,霍翔.2019年江苏省部分地区儿童腹泻沙门菌的感染率及耐药状况研究[J].食品安全质量检测学报,2020，11(15):5150-5155.

[16]段胜钢,齐辰,陆冬磊，等. 2018年上海市非伤寒沙门菌感染流行病学特征分析[J].中国食品卫生杂志,2020,32(4):422-426.