植物生长调节剂是一类通过调控植物的生理过程，达到稳产增产、改善农作物品质、增强作物抗逆性等性质的有机物质，在实际的农业生产中已被广泛应用。当前，现有的植物生长调节剂检测方法包括气相色谱法、液相色谱法、气相色谱-质谱法、气相色谱-串联质谱法、液相色谱-质谱法、高效液相色谱-串联质谱法等，但前面两种方法存在灵敏度不够、前处理繁琐等问题。气相色谱法与液相色谱法大部分报道应用于单一组分的检测，如乙烯利^［1］、2,4-二氯苯氧乙酸^［2］、赤霉素^［3］、多效唑^［4］等。液相色谱法与气相色谱法比较，样品前处理较为简单，但检出限仍不能与质谱仪相比较。随着质谱技术的成熟和发展，气相色谱-质谱和高效液相色谱-串联质谱技术也同样在植物生长调节剂的检测中发挥着重要作用^［5-7］。　　QuEChERS法是近年来农产品检测的快速样品前处理技术，利用吸附剂填料与基质中的杂质相互作用，从而达到除杂净化的目的。周纯洁等^［8］建立了QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱法同时测定蔬菜中6种植物生长调节剂残留量的检测方法；但关于QuEChERS与气相色谱-串联质谱的报道相对较少，徐宜宏等^［9］报道了关于苹果、番茄、玉米中莠去津、甲萘威、三唑酮、西玛津、戊唑醇、烯效唑、多效唑7种植物生长调节剂气相色谱-串联质谱检测方法，其主要的净化方法为乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）粉末和石墨化碳黑粉末结合；高强^［10］建立了关于豆芽中多组分植物生长调节剂残留的质谱检测，其气相色谱-质谱法检测的净化方式为MCS固相萃取。　　本试验通过优化样品提取、净化条件和仪器条件，建立应用改进QuEChERS法结合气相色谱-串联质谱法检测水果中4-氯苯氧乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸、萘乙酸、吲哚乙酸和吲哚丁酸5种植物生长调节剂的分析方法。
Trace Ultra GC/XLS气相色谱-串联质谱仪（美国Thermo）、超声波清洗器、振荡器、漩涡混匀器、水浴箱、氮吹仪、分析天平。　　4-氯苯氧乙酸（CAS：122-88-3）、2,4-二氯苯氧乙酸（CAS：94-75-7）、萘乙酸（CAS：86-87-3）、吲哚乙酸（CAS：87-51-4）和吲哚丁酸（CAS：133-32-4）标准品，纯度均为99.0%，均购自德国Dr Ehrenstorfer GmbH；二氯甲烷、无水硫酸钠、甲醇均为分析纯，三氟化硼甲醇溶液（13%～15%），正己烷、乙酸乙酯均为色谱纯；乙酸乙酯-正己烷（2∶8，V/V）：吸取2.00 ml乙酸乙酯和8.00 ml正己烷混匀；三氟化硼甲醇溶液：吸取1 ml三氟化硼甲醇溶液（13%～15%）和9 ml甲醇混合而成，现配现用。Cleanert PSA、Cleanert C18均购自博纳艾杰尔科技公司。
5种植物生长调节剂混合贮备液（1.00 mg/ml）：分别称取10.1 mg（精确至0.000 1 g，折算为100%含量）上述5种植物生长调节剂标准品，用甲醇分别溶解并定容至10 ml，4 ℃保存。　　1.00 mg/L植物生长调节剂混合标准应用液：各吸取1.00 mg/ml植物生长调节剂贮备液50 μl，用甲醇定容至50 ml，4 ℃保存。
取苹果（去柄）、橘子、香蕉、葡萄样品1 kg左右，置搅拌机中全果搅碎，转至500 ml聚乙烯塑料瓶中冷藏保存。
称取水果样品5.0 g，用20～40 g无水硫酸钠研磨至干粉状，倒入碘量瓶中，加入30 ml二氯甲烷，振摇30 min后全量移取上清液，再加入30 ml二氯甲烷重复提取一次，合并上清液后40 ℃氮吹至近干，在氮吹瓶内加入1.00 ml甲醇超声复溶，待衍生处理。
在已加入甲醇复溶后的氮吹瓶中加入1 ml三氟化硼甲醇衍生溶液，涡旋混匀后加入净化剂（50 mg PSA + 50 mg C18），涡旋混匀，然后放置恒温水浴箱中，以70 ℃衍生30 min。冷却后，迅速加入2 ml超纯水和1.00 ml乙酸乙酯-正己烷（2∶8，V/V）溶液，经涡旋混匀后静置30 min，取上层有机相过0.22 μm滤膜后上机检测。
色谱：DB-5MS毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；进样口温度250 ℃；升温程序：80 ℃保持1 min，以10 ℃/min速率升至250 ℃，以20 ℃/min速率升至300 ℃，保持4 min；载气：氦气，纯度≥99.999%，流速1.5 ml/min；进样量1 μl；电离方式：电子轰击电离（EI）源，70 eV；传输线280 ℃；离子源温度250 ℃；进样方式：不分流进样。　　质谱：5种植物生长调节剂的质谱参数见表1。
QuEChERS净化剂可直接作用于提取液中，选择性地保留基质干扰成分而达到净化的目的。C18主要用于去除基质中的脂类等非极性干扰物；PSA主要用于吸附基质中的有机酸和脂肪酸。由于4-氯苯氧乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸、萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸均含有羧基官能团，而PSA（N-丙基乙二胺）的官能团含有两个氨基，在加入衍生剂前加入可能会对目标物产生吸附作用。本试验主要考察改良后的QuEChERS体系对5种植物生长调节剂的影响，方案主要内容包括在苹果、橘子、香蕉、葡萄4种水果中添加3种浓度水平的化合物，测定3种QuEChERS组合的加入方式对5种植物生长调节剂的影响——以平均回收率计算。5种植物生长调节剂在加入三氟化硼衍生剂后，在室温下会缓慢发生衍生反应，因此在试验中均选择加入衍生剂后再净化，避免直接加入PSA后可能会吸附目标物。第一种方式为在加温衍生化后加入50 mg PSA对样品进行净化；第二种方式为加入三氟化硼甲醇衍生溶液后再加入50 mg PSA+50 mg C18进行净化，然后加温进行进一步衍生；第三种方式为在加温衍生化后加入50 mg PSA+50 mg C18对样品进行净化。结果显示第一种方式加入净化体系后，方法的平均回收率在44.0%～101%之间，第二种方式加入净化体系后，方法的平均回收率在61.4%～107%之间，第三种方式加入净化体系后，方法的平均回收率在49.1%～109%之间。从图1～4的结果可见，以第二种方式处理，5种植物生长调节剂的回收率均大于其他两种方式；第一种方式与第三种方式比较，第一种方式处理后目标物的加标回收率较好，可能在衍生后加入C18，会对试验生成的衍生物有部分吸附；因此本试验的QuEChERS体系采用在加入三氟化硼甲醇溶液后再加入50 mg PSA+50 mg C18进行净化，然后再加温衍生。 试验对比了非极性TR PESTICIDE II色谱柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）和DB-5MS色谱柱［30 m×0.25 mm，0.25 μm，（5%-苯基）-95%二甲基聚硅氧烷］对待测物的分离效果。结果显示，5种植物生长调节剂均分离良好，但在TR PESTICIDE II色谱柱5种植物生长调节剂均有拖尾现象，因此选择了DB-5MS色谱柱来分析待测物。
试验过程中，先选用单针进样的方式对标准品进行全扫描，选出母离子和相对应的保留时间；通过优化碰撞能量，根据数据结果选择最佳的碰撞能量，得到最佳子离子灵敏度；最后采用高选择性反应监测（H-SRM）对5种植物生长调节剂进行监测，5种植物生长调节剂的SRM色谱图见图5，质谱分析参数见表1。 根据建立的试验方法，选取水果空白基质配制5种植物生长调节剂的混合标准溶液，在10.00～1 000 μg/L范围内呈良好线性关系，线性相关系数（r）均>0.999。以三倍信噪比（S/N=3）计算得到5种植物生长调节剂的检出限，以十倍信噪比（S/N=10）计算得到5种植物生长调节剂的定量限，见表2。 　　选取空白基质，采用标准加入法，测定5种植物生长调节剂的回收率及精密度，见表3。5种植物生长调节剂的添加水平为0.010、0.100和0.200 mg/kg，结果表明，5种植物生长调节剂的回收率在63.4%～107%之间，RSD在0.480%～14.8%之间，其精密度和准确度均符合检测方法确认的技术要求。
从中山市水果市场采集香蕉、苹果、葡萄、橘子4种水果各6份进行分析，结果显示有两份香蕉检出4-氯苯氧乙酸和吲哚乙酸（见图6、7），含量为0.005和0.002 mg/kg；其他均未检出。 通过对样品前处理和仪器分析条件进行优化，建立了二氯甲烷提取，QuEChERS萃取净化，同时测定水果中5种水果植物生长调节剂的气相色谱-串联质谱检测方法，5种植物生长调节剂的回收率和线性关系良好，能够满足水果中的植物生长调节剂的残留量检测分析。