基于可视化和实时荧光环介导等温扩增技术快速鉴定日本红菇
作者:
作者单位:

1.上海海洋大学食品学院,上海 201306;2.上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所, 农业农村部农产品质量安全风险评估实验室(上海),上海 201403;3.湖南农业大学动物医学院, 湖南 长沙 410128;4.吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心,吉林 长春 130118

作者简介:

赵兰馨 女 硕士研究生 研究方向为农产品质量安全和快速检测技术 E-mail:zhaolanxin2021@163.com

通讯作者:

周昌艳 女 研究员 研究方向为农产品质量安全与标准化 E-mail:zhouchangyan@saas.sh.cn

中图分类号:

R155

基金项目:

国家重点研发计划课题(2019YFC1604703)


Rapid identification method for Russula japonica based on visual and real-time fluorescent loop-mediated isothermal amplification strategies
Author:
Affiliation:

1.College of Food Science & Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;2.Institute for Agro-food Standards and Testing Technology, Laboratory of Quality & Safety Risk Assessment for Agro-products (Shanghai), Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Shanghai Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 201403, China;3.College of Veterinary Medicine, Hu’nan Agricultural University, Hu’nan Changsha 410128, China;4.Institute of Mycology, Engineering Research Center of Chinese Ministry of Education for Edible and Medicinal Fungi, Jilin Agricultural University, Jilin Changchun 130118, China

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    摘要:

    目的 利用可视化和实时荧光环介导等温扩增(LAMP)技术,建立日本红菇的快速鉴别方法。方法 基于日本红菇内转录间隔区的基因序列设计了特异性的LAMP引物,在23种蘑菇物种间进行特异性验证,通过检测10 ng/μL~1 fg/μL系列浓度的基因组DNA,评估方法的灵敏度。结果 设计的LAMP引物可特异性鉴别日本红菇,不与其他蘑菇种类发生交叉反应。建立的LAMP方法检测灵敏度为1%混合蘑菇样本,或终浓度为2 pg/μL的日本红菇DNA。结论 本方法可用于新鲜/干制蘑菇及烹饪后蘑菇的检测,检测时间<1 h,其中可视化方法无需专业仪器设备,适用于日本红菇的现场快速鉴别。

    Abstract:

    Objective A method for the rapid detection of Russula japonica was established based on a visual or real-time fluorescent loop-mediated isothermal amplification (LAMP) strategy.Methods A LAMP primer group targeting the internal transcribed spacer sequence of R. japonica was designed and primer specificity was tested in 23 mushroom species. The sensitivity of the method was assessed by detecting DNA at a series of concentrations ranging from 10 ng/μL to 1 fg/μL.Results The designed primers specifically identified R. japonica without cross-reaction with the other 22 mushroom species. Both developed LAMP methods could detect as low as 2 pg/μL of a DNA template or 1% R. japonica in different mushroom mixtures.Conclusion The established method is suitable for rapid on-site identification of R. japonica and can be applied to fresh, dried, or cooked mushroom samples, with a detection time of <1 h. This visualization strategy does not require professional equipment and is suitable for the rapid identification of R. japonica.

    参考文献
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    引证文献
引用本文

赵兰馨,赵晓燕,易思亮,田恩静,范婷婷,赵志勇,周昌艳.基于可视化和实时荧光环介导等温扩增技术快速鉴定日本红菇[J].中国食品卫生杂志,2023,35(10):1440-1447.

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  • 收稿日期:2022-07-17
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  • 在线发布日期: 2024-02-04
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